一起了解下電泳實(shí)驗(yàn)裝置的實(shí)驗(yàn)原理和實(shí)驗(yàn)步驟
電泳實(shí)驗(yàn)裝置的數(shù)字顯示A、V數(shù)值,可選擇穩(wěn)壓或穩(wěn)流狀態(tài)工作,工作參數(shù)連續(xù)可調(diào),用于分離蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子物質(zhì)的常壓電泳。操作簡單、便捷。電泳實(shí)驗(yàn)裝置的組成:數(shù)字式直流穩(wěn)壓電源、鉑電極、U型電泳槽、電泳槽支架。
電泳實(shí)驗(yàn)裝置的實(shí)驗(yàn)原理
RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進(jìn)行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠,不同的RNA條帶也能分開,但無法判斷其分子量。只有在*變性的條件下,RNA的泳動(dòng)率才與分子量的對數(shù)呈線性關(guān)系。因此要測定RNA分子量時(shí),一定要用變性凝膠。在需快速檢測所提總RNA樣品完整性時(shí),配制普通的1%瓊脂糖凝膠即可。
電泳實(shí)驗(yàn)裝置的實(shí)驗(yàn)步驟
?。?)用1×TAE電泳緩沖液制作瓊脂糖凝膠,加1×TAE電泳緩沖液至液面覆蓋凝膠。
(2)在超凈工作臺(tái)上,用移液器吸取總RNA樣品4μl于封口膜上。在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上再加入5μl1×TAE電泳緩沖液及1μl的10X載樣緩沖液,混勻后,小心加入點(diǎn)樣孔。
?。?)打開電源開關(guān),調(diào)節(jié)電壓至100V,使RNA由負(fù)極向正極電泳,約30min后將凝膠放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射檢測儀上觀察RNA電泳結(jié)果。
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